4.2.1 需要帶入無菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經過適宜的方法滅菌。

4.2.2 待檢樣品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。4.2.3 進入無菌室后，隨手關好門，操作過程中嚴禁人員出入。

4.2.4 無菌操作應在超凈臺上進行，每次操作過程中，均應做空白對照試驗樣，以檢查無菌操作的可靠性。檢測過程嚴格按照檢測規程進行，確保檢測結果準確無誤。

4.2.5 儀器、器械、平皿等物品需從傳遞窗口傳入無菌室。

4.2.6 如有菌液或樣品灑在超凈臺上，應立即用75%的酒精棉球擦拭干凈，在消毒處理。

4.2.7 滅菌后物品放在指定位置，注明滅菌日期，高壓滅菌物品可存放3天，過期不能再用，需重新包裝滅菌。

4.3 清洗要求

4.3.1 帶有菌液的吸管、試管、培養皿等器皿應浸泡在盛有0.1%新潔爾滅溶液或其它消毒溶液的消毒桶內消毒。

4.3.2 凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。

4.3.3 操作完畢，臺內物品全部取出并用消毒液噴灑消毒，用后的物品歸位，垃圾帶出無菌室，再用紫外燈輻照20分鐘。

4.4無菌室的清潔消毒

4.4.1 無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。

4.4.2 無菌室應每月檢查菌落數。在超凈工作臺開啟的狀態下，取無菌培養皿分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露15分鐘后，倒置于36℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級超凈臺平板雜菌數平均不得超過1個菌落，10000級無菌操作間平均不得超過3個菌落。如超過限度，應對無菌室進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。

4.4.3 除每日進行清潔和使用前的殺菌之外，要根據空白樣的檢測情況，及時對無菌室進行徹底的熏蒸或消毒。