一、原理
生物顯微攝影(Microphotography)是利用攝影裝置來(lái)拍攝顯微鏡視野中所觀察到的物像。在生物醫(yī)學(xué)方面，主要用于對(duì)正常細(xì)胞或病變細(xì)胞的顯微形態(tài)學(xué)研究記錄。
二、操作步驟
(一)拍攝前準(zhǔn)備
1．光路合軸 使光軸與光束處于同一軸線上。
2．柯勒氏照明 使觀察的視野獲礙均勻而又充分的照明；防止雜散光對(duì)照相系統(tǒng)產(chǎn)生影響；使被攝物體不受熱，影象清晰。
3．物鏡與目鏡合理組合 依標(biāo)本的不同和顯微攝影要求，物鏡與目鏡的組合有一定規(guī)范，如：拍攝人類染色體影像，采用高分辨率的100倍油鏡，配合10倍目鏡，可獲得良好分辨的理想放大影像。
4．調(diào)整視場(chǎng)光闌和孔徑光闌 使兩者與所用物鏡的數(shù)值孔徑(N．A．鏡口率)相等，所得的分辨力最高；視場(chǎng)光闌一旦調(diào)好，不要再動(dòng)，而孔徑光闌可隨物鏡數(shù)值孔徑的更換，做相應(yīng)的調(diào)整。一般來(lái)說(shuō)，把孔徑光闌的大小調(diào)成等于相應(yīng)該物鏡孔徑像的2／3為宜，盡管喪失了少許的分辨力，卻能提高影像的反差、焦點(diǎn)深度和清晰度。
總之，上述作法是調(diào)整顯微鏡至最佳狀態(tài)。
(二)拍攝程序
拍攝是顯微攝影系列操作中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，在鏡檢觀察中，發(fā)現(xiàn)需要攝下的影像應(yīng)即時(shí)拍照。
1．開(kāi)啟相機(jī)后蓋，安裝膠卷于照相機(jī)內(nèi)。
2．打開(kāi)顯微鏡照明裝置的電源開(kāi)關(guān)，將亮度調(diào)至適當(dāng)。
3．依個(gè)人的視力，調(diào)整攝影目鏡調(diào)焦環(huán)至“井”字線清晰。
4．放一片需要拍攝的標(biāo)本載玻片于載物臺(tái)上。在低倍鏡下選好要拍攝的核型或細(xì)胞結(jié)構(gòu)，再轉(zhuǎn)換到油鏡下，聚焦標(biāo)本細(xì)節(jié)，準(zhǔn)備拍照。
5．按下曝光按鈕，曝光按鈕亮表示曝光開(kāi)始進(jìn)行，熄滅表示曝光完畢。
6．拍攝記錄
(三)黑白膠片的沖印
感光膠片在拍攝完畢后，需盡快在暗室中沖洗和曬印，其方法和普通照像相似。其基本原理是顯影液使膠片已感光的銀鹽潛影還原為可見(jiàn)的金屬銀影像；停影液使顯影液失去顯影能力，防止顯影過(guò)度與斑痕出現(xiàn)；定影液把未被還原的鹵化銀溶去，晾干是便于膠片和相紙保存。
1．沖印的操作步驟
(1)把膠片裝入顯影罐中(切勿粘在一起)先用清水沖洗，排除氣泡．然后再把水倒掉，這有利于顯影液的快速均一作用。
(2)從頂部罐口注入預(yù)先配好的約250ml D-72式顯影液。20℃顯影4～12分鐘。
(3)顯影中輕輕搖影罐，使膠片表面充分受顯影液作用，顯影完畢，迅速倒出顯影液。
(4)立即注入250ml預(yù)先配好的SB—I式停影液，停顯時(shí)間為10秒，倒出停影液，隨之加入250ml的F一5式酸性堅(jiān)膜定影液，20℃定影15分鐘。取出膠片流水沖洗30分鐘以上。
(5)將膠片掛起，用脫脂棉輕輕吸掉膠片表面過(guò)多的積水，晾干。
(6)晾干后用放大機(jī)的膠片夾子夾住膠片，藥膜面朝下，聚焦取景，然后在紅燈條件下，用壓紙板壓住所需號(hào)放大像紙，藥膜面向上．進(jìn)行曝光(適當(dāng)?shù)钠毓鈺r(shí)間要經(jīng)試驗(yàn)后決定)。
(7)曝光后的像紙，浸入D-72顯影液中，然后用竹鑷子不時(shí)地夾住像紙翻動(dòng)，直到顯影適度為止。
(8)顯影合適后立即移到SB-I式停影液中，漂洗10～20秒，再浸入定影液中處理15分鐘，取出在流水中沖洗60分鐘左右。
(9)水洗后，放在電熱上光機(jī)上烘干；裁邊，裝入有說(shuō)明的紙袋內(nèi)保存。
三、結(jié)果
照片上可見(jiàn)染色體或細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)清晰，反差適中。