骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)

1．殺死動(dòng)物，無(wú)菌取大腿肌組織，切成0.3～0.5厘米小塊。

2．用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，無(wú)菌紗網(wǎng)或紗布濾過(guò)，合成培養(yǎng)基加10％小牛血清培養(yǎng)，為促進(jìn)分化可加1％的胎汁。

3．細(xì)胞接種量為2×106/皿，接種在膠原或明膠的底物上能促進(jìn)細(xì)胞分化。明膠制備比較簡(jiǎn)單，常用Hanks液配的0.01％明膠。

肌細(xì)胞培養(yǎng)

1．選新鮮受精雞卵，置溫箱中孵育（溫箱中放有水槽，以維持箱內(nèi)溫度），每日翻動(dòng)一次（180度），孵育9～12天。

2．取雞胎法相間《組織培養(yǎng)和分子細(xì)胞學(xué)技術(shù)》53頁(yè)。

3．用眼科剪剪開(kāi)胸腔，剝出心臟，置入皿中用Hanks液漂洗1～2次。

4．小心剪除大的動(dòng)靜脈，保留心室肌，用組織塊或消化培養(yǎng)法均可。