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單克隆抗體技術-脾細胞

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-27

1.材料
(1) 免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。
(2) 1640培養液
(3) 2.5%FCS-1640營養液
2.操作方法
(1) 拉頸或用CO2處死小白鼠。
(2) 將小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在無菌條件下取脾。
(3) 把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰浴下輕輕洗去脾上的紅血球。
(4) 用鑷子輕輕擠壓脾,做成脾細胞懸液,用毛細管將懸液移入小試管中。
(5) 直立小試管3min,使大塊的結締組織下沉,把細胞懸液移入離心管中。
(6) 以2.5%FCS—1640充滿離心管,并以400g離心7min~10min(與此同時應開始制備骨髓細胞)。
(7) 把沉淀用約10ml的新鮮培養液再懸浮。
(8) 重復⑹、⑺步驟。
(9) 計算細胞,以臺盼蘭染色用相差顯微鏡檢查,活細胞數應高于80%為合格。

 

 
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