1.波長準確度的檢驗：

分光光度計在使用過程中，由于機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因，經常會出現刻度盤上的讀數與實際通過溶液的波長不符合的現象，因而導致儀器靈明度降低，影響測定結果的精度，需要進行檢驗。

檢驗波長準確度最簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值, 如果測出的值與濾光片標準值之差超出規程規定，則需要進行波長調節。

2.透射比正確度的檢驗：

用透射比標準值分別為10 %、20 %、30 %左右的光譜中性濾光片，可見光區分別在440、546、635nm波長處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。

3.穩定度的檢驗：

在零點不受光的條件下，用零點調節器將儀器調至零點，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點穩定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調節零點后，蓋上樣品室蓋(打開光門)，使光電管受光，調節透射比為95%（數顯儀器調至100%）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩定性。 

4.光的檢驗：

可見分光計棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計在220nm處分別用符合規定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應波長下的雜散輻射率。

使用分光光度計的步驟與方法

預熱儀器：

為使測定穩定，將電源開關打開，使儀器預熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。

選定波長：

根據實驗要求，轉動波長調節器，使指針指示所需要的單色光波長。

固定靈敏度檔：

根據有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數為0.2～0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。

調節“0”點：

輕輕旋動調“0”電位器，使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。

調節T=100%：

將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內，有色溶液放在其它格內，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉動光量調節器，使透光度T=100%，即，表頭指針恰好指在T=100%處。

測定：

輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進入光路，此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A，讀數后，打開比色皿暗箱蓋。

關機：

實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。

使用分光光度計都有什么注意事項？

1）為了防止光電管疲勞：

不測定時必須將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷，以延長光電管使用壽命。

2）比色皿的使用方法：

①拿比色皿時：

手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。

②清洗比色皿時：

一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如，比色皿被有機物沾污，可用鹽酸－乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。每次做完實驗時，應立即洗凈比色皿。

③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干：

以保護透光面。

④測定有色溶液吸光度時：

一定要用有色溶液洗比色皿內壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時，通常都按由稀到濃的順序測定，以減小測量誤差。

⑤在實際分析工作中：

通常根據溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。

分光光度計的維護和保養

分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用和保養對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度有重要作用。

1.對儀器工作環境的要求

分光光度計應安裝在穩定的工作臺上，(周圍不應有強磁場, 以防電磁干擾)，室內溫度應保持在(10～30)℃。室內應干燥，相對濕度宜控制在<85 %，室內應無腐蝕性氣體，光線不宜過強。

2.儀器保養和維護方法

(1)儀器工作電壓一般為220V，允許±10 %的電壓波動。為保持光源燈和檢測系統的穩定性，在電源電壓波動較大的實驗室最好配備穩壓器。

(2)為了延長光源使用壽命，在不用時不用開光源燈。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩定，應及時更換新燈。更換后要調節好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附，若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。

(3)單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內，不能拆開，為防止色散元件受潮發霉，必須經常更換干燥劑。

(4)必須正確使用吸收池，保護吸收池光學面。

(5)光電轉換元件不能長時間曝光，應避免強光照射或受潮積塵。