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紫外-可見分光光度分析法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-11-18
不同分子的前線軌道的類型不同。位于最高占有的分子軌道上可為σ,π鍵電子,也可為孤對(duì)電子nd電子等。最低空軌道可為σ*,π*d軌道,因此前線軌道間的躍遷能不一。烷烴類分子為σ→σ*遷,躍遷能在遠(yuǎn)紫外區(qū)。當(dāng)分子中含有電負(fù)性大的帶有孤對(duì)電子的雜原子(鹵素、O、SN等)、含這些雜原子的基團(tuán)(—OH,—NH2,—SH等)或不飽和基團(tuán)(如 等)時(shí),便出現(xiàn)n→σ*n→π*,π—π*的躍遷。這些躍遷都出現(xiàn)在紫外及可見光區(qū),通常這種基團(tuán)被稱作生色基團(tuán)。不同取代基的吸收特性——最大光吸收波長(zhǎng)不同: 的約為270nm, 的約為204nm,—N==N—的約為410nm 的約為193nm,—CN的約為160nm。配位化合物常常具有特征的dd躍遷光譜也在此區(qū)。因此當(dāng)分子吸收紫外可見光輻射即可產(chǎn)生分子前線軌道中各種電子能級(jí)的躍遷從而形成特征光譜,利用這些特征光譜可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析。紫外-可見分光光度法也像原子吸收光譜法一樣,遵循比爾-蘭伯特吸收定律:

A=lgI0I=εcb

它說明了,在指定的光程b及被測(cè)物的摩爾消光系數(shù)ε(對(duì)各物種是特定的常數(shù))下,吸光度A正比于被測(cè)溶液濃度c。與同時(shí)在這特定波長(zhǎng)下測(cè)量不同濃度的已知標(biāo)準(zhǔn)試樣的吸光度所得的工作曲線相比較,可得到定量分析的結(jié)果。

紫外-可見分光光度計(jì)常常是利用熱致輻射的鎢絲燈或鹵鎢燈作為產(chǎn)生可見光區(qū)的光源。而用氫燈或氘燈作為產(chǎn)生紫外區(qū)的光源。光源經(jīng)過一旋轉(zhuǎn)的色散元件(單色器)使復(fù)合光分解成為波長(zhǎng)連續(xù)變化的單色光,經(jīng)過盛放著試樣的石英(適用于紫外及可見光區(qū))或玻璃(只適用于可見光區(qū))的樣品吸收池,由檢測(cè)系統(tǒng)接收并記錄相應(yīng)波長(zhǎng)下透射光的強(qiáng)度的譜圖。

紫外-可見(UV-VIS)分光光度分析法的特點(diǎn)和適用范圍是:

1)廣泛應(yīng)用于被測(cè)物中已知組分的定量分析。可以用作常量(克數(shù)量級(jí))的,也可作痕量(100μg·cm-3)的反超痕量(<1μg·cm-3)組分的定量測(cè)定。還可同時(shí)測(cè)量混合物中多種組分,常用于水中雜質(zhì)分析。常規(guī)檢出限量可低達(dá)108克。

2)準(zhǔn)確度高,儀器設(shè)備較簡(jiǎn)單。

3)適用于有機(jī)物分子部分結(jié)構(gòu)及官能團(tuán)的分析與鑒定,尤其是含有生色基團(tuán)和共軛π鍵體系的有機(jī)物的鑒定,但不能判斷整個(gè)分子的結(jié)構(gòu)。該法也適用于無機(jī)離子,尤其是過渡金屬元素的分析測(cè)定。在判別異構(gòu)體結(jié)構(gòu)、過渡金屬配合物結(jié)構(gòu)方面它有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。

4)由于紫外-可見光譜譜帶寬而少,多數(shù)譜帶特征性不強(qiáng)大,故只能用作定性鑒定的輔助工具。實(shí)際工作中,應(yīng)把它與紅外、核磁共振、質(zhì)譜等配合起來使用,以判定分子結(jié)構(gòu)。

 
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