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生物標本常用反應劑的配制

放大字體  縮小字體 發布日期:2005-11-18
   1、檢查葡萄糖試劑

配方一    本尼迪克(Benedict)溶液

1 400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克無水碳酸鈉。

2 50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅。

把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如果產生沉淀,要過濾。本尼迪克溶液配制后能長期使用(存放時間較久而產生沉淀是,取上層清液使用,不必重新配制)。

本尼迪克溶液用來測試食物、血液和尿中的葡萄糖,可測出0.15 0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時,如果未知物中有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉淀物。

配方二  裴林(Fehling)溶液

1)把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。

2)把125克氫氧化鉀(鈉)和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。

上述兩種溶液應分別保存。在檢測葡萄糖時,使他們等量的混合,加入待測物的試管內,加熱到沸騰。如果有葡萄糖,會形成紅色的氧化亞銅沉淀物。

2、檢查淀粉的試劑

魯哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)

6克碘化鉀溶于20毫升蒸餾水中,攪拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸餾水,貯存在棕色試劑瓶內。

碘液用來測試食物樣品或葉片中的淀粉,也用作染色劑,例如可染色鞭毛、纖毛和細胞核等。

3、檢查蛋白質的試劑

配方一    米倫(Millon)試劑

60毫升濃硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋,靜置澄清后,取它上層的清液備用。這種試劑可長期保存。

在待測物中加入少量米倫試劑,加熱,如果有蛋白質,會出現紅色。這種試劑不能用來測定尿中的蛋白質。

配方二    雙縮尿試劑

分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。

3毫升待測物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和11%硫酸銅溶液。如果有蛋白質,會出現紫色反應。

4、檢查脂肪的試劑

蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液

0.2克蘇丹(或蘇丹),放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過濾后密閉在試劑瓶內保存備用。

5、酸堿指示劑

配方一    酚酞試劑和試紙

酚酞試劑  1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,裝在試劑瓶內密閉保存。

酚態試紙  1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕后,取出,放在無氨氣影響處晾干。

酚泰試劑(試紙)  pH值變色范圍8.210,在酸性和中性溶液中都無色,再堿性溶液中呈深紅色。

配方二    紅藍石蕊試紙

取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中攪拌,使它溶解,然后過濾。把濾液分成兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現藍色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條,隨后取出濾紙條,放在蔽光處、無酸堿性氣體影響的地方晾干,即的紅、藍兩種石蕊試紙。

紅石蕊試紙在堿性溶液中變藍,藍石蕊試紙在酸性溶液中變紅。

6、檢查二氧化碳的試劑

檢查二氧化碳的試劑,可用溴代麝香草酚藍溶液和石灰水。

配方一    溴代麝香草酚藍溶液

0.1克溴代麝香草酚藍,溶解在100毫升蒸餾水里,滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液,使它成為弱堿性溶液而呈藍色。

溴代麝香草酚藍溶液pH值變色范圍是6.0(黃)~7.6(藍)。待測物中如果有二氧化碳,會形成碳酸而使溶液變成黃色。

配方二    石灰水

在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣),變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈飽和狀態時為止。在石灰水澄清后,傾出上層清液,用濾紙過濾,放在密閉瓶內保存。

如果測定的物質中有二氧化碳,會生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁。

7、檢查細胞生活力的試劑

檢查細胞有無生活力,可用中性紅甲基藍試劑。配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍溶液,這兩種溶液各取1份混合,用來鑒定細胞的死活。該試劑使活細胞的液泡染上紅色,而使死細胞全部染成藍色。

 
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