黃曲霉毒素是一類真菌（如黃曲霉和寄生曲霉）的有毒的代謝產物，它們具有很強的致癌性，主要存在于藥材、谷物、堅果、棉籽以及動物飼料相關的產品中。其毒性遠遠高于氰化物、砷化物和有機農藥的毒性，其中以B₁毒性最大。當人攝入量大時，可發(fā)生急性中毒，出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續(xù)攝入，可造成慢性中毒，生長障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。 

國家重視程度：

    近年來，各級食品藥品監(jiān)管部門不斷加大中藥生產流通監(jiān)管力度，努力保持中藥質量總體穩(wěn)定。

    國家食品藥品監(jiān)督管理局關于規(guī)范中藥生產經營秩序嚴厲查處違法違規(guī)行為的通知（國食藥監(jiān)安[2012]187號中，要求加強對重金屬及有害元素、農藥殘留、黃曲霉毒素等安全性指標的檢測和控制，切實保證中藥材質量和安全，另要求企業(yè)具備與生產品種相適應的檢驗設備和能力，嚴把質量檢驗關。《國家藥品安全“十二五”規(guī)劃》，規(guī)劃中明確提出“開展藥品快速檢驗技術研究，搭建檢驗技術共享平臺”、“加快推進藥品快速檢驗技術在基層的應用，配置快速檢驗設備”、“加強縣級機構快速檢驗能力建設”的要求。
中藥中黃曲霉毒素的檢測方法：

    2010版《藥典》附錄IX V 黃曲霉毒素測定采用高效液相色譜法，另外增補藥典描述該法檢測建立增加柱后光化學衍生法。

華安麥科作為國內最早從事霉菌毒素檢測研究的高新技術企業(yè)對黃曲霉毒素檢測也有深刻的探索研究，下面就我們的實踐和大家分享一下，免疫親和柱-高效液相色譜法-柱后光化學衍生等內容。

【原理】：

    樣品經甲醇-水提取，提取液經過濾、稀釋，濾液經過含有黃曲霉毒素特異抗體的免疫親和柱層析凈化，黃曲霉毒素交聯(lián)在層析介質中的抗體上，此抗體對黃曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂具有專一性，用水將免疫親和柱上雜質除去，以甲醇通過免疫親和柱洗脫，再經光化學衍生器柱后衍生，以提高檢測準確性。

【主要試劑及耗材】：

ToxinFast^®氣控操作架：含氣泵

ToxinFast^®黃曲霉毒素免疫親和柱1ml或3ml

ToxinFast^®光化學衍生器

ToxinFast^®玻璃微纖維濾紙 ：直徑11cm、孔徑1.5µm

ToxinFast^®玻璃試管：直徑12mm，長75mm，無熒光特性

ToxinFast^®注射器：10ml、20ml

【檢測步驟】：

    樣品粉碎——提取——洗脫液進樣、親和柱凈化——化學衍生——檢測數(shù)值（做過液相的都知道這些步驟的，在這里就簡單提一下，主要是為什么用到氣控操作架和化學衍生器在下面解釋一下！）

氣控操作架的使用說明：

    在樣品粉碎后需要過親和柱凈化，也就是怎么方便親和柱使用操作的問題，氣控操作架能有效地提高這個環(huán)節(jié)的工作效率（很方便操作的），如圖示：

1 連接組裝好的氣控操作架，將免疫親和柱、注射器針筒與氣控操作架連接，如圖所示；

2 將處理后的溶液上樣；

3 調節(jié)空氣泵旋鈕以控制流速，使樣液以1-2d/s的速度流出；

4，待樣液完全排干，用去離子水或蒸餾水以2-3d/s的流速洗滌兩次，每次10ml；

5，待液體完全排干，將樣品瓶置于親和柱下方，上樣1ml甲醇以1d/s的速度流出至完全排干。

以上操作步驟是用免疫親和柱--高效液相法檢測中藥中黃曲霉毒素的必經步驟，如使用氣控操作架就能很好的固定親和柱并以可控流速操作，既高效也能使操作誤差減到最小。

華安麥科ToxinFast^®氣控操作架具有6支可控支流，能同時有效檢測多個樣本，還適用于

1ml和3ml多種規(guī)格免疫親和柱。

為什么使用光化學衍生器？

    由于黃曲霉具有較強的紫外吸收和產生熒光的特性，因此可以進行HPLC-紫外或熒光檢測，但是同時黃曲霉毒素中的B₁、G₁由于其在含水的流動相中容易產生熒光淬滅，因此在很多的實驗中都會采用衍生法測定黃曲霉毒素。

衍生的方法也很多：有柱前的，柱后的，在線的，由于在線的柱后光化學衍生有明顯的優(yōu)勢，所以現(xiàn)在被增補為藥典的檢測方法，優(yōu)勢主要在于（無需任何化學試劑、對人員無傷害；無需人員直接操作、避免誤差; 無需擔心衍生液腐蝕檢測器）

大家看完上圖肯定也能感受到在線光化學衍生的效果，希望這個分享可以給大家做黃曲霉毒素檢測時提供小小的幫助。