在測定新藥的急性毒性實驗（LD₅₀）時，動物如出現豎毛，活動增加，激動興奮，以致發展為強直一陣攣性抽搐，可初步考慮為擬交感藥。進而可觀察其動物（或貓）血壓的反應，如興奮α-受體，則對血壓影響較大，并反射地使心率減慢，如興奮β受體，可見血壓下降和心率明顯增快。為了較確切地區分其對α、β受體的作用，還可采用α受體阻斷藥酚妥拉明，β受體阻斷藥心得安等作為工具。除血壓實驗外，尚可采用貓瞬膜，貓（或狗）在體腸活動等實驗方法。利用一些體外實驗可分析擬交感藥的作用部位，其中最敏感的實驗之一是大白鼠胃底條，此外有兔頭肌、離體兔耳、豚鼠氣管鏈、豚鼠回腸和雞盲腸等制備。可用已知的α或β-受體興奮劑作為標準，觀察它們與α或β-受體阻斷藥的相互作用，而確定其作用部位。

乙酰膽鹼具有毒蕈堿樣及菸堿樣作用，前者可被阿托品阻斷，后者可被神經節阻滯藥及橫紋機松馳藥阻斷。凡是通過直接或間接作用興奮副交感效應點的藥物可出現流淚、流涎、排尿和排便癥候群。因此在小白鼠LD₅₀實驗中可獲得初步印象，進而分別觀察其對血壓、唾液、瞳孔及胃腸道等反應。在貓血壓實驗、蛙心、蛙腹直肌、水蛭背肌等標本上可檢定擬膽堿藥和觀察抗膽堿藥的作用，亦可用整體實驗如抑制大白鼠胃潰瘍，抑制大白鼠腸內活性炭下移等方法觀察之。