a国产亚洲欧美精品一区在线观看_看一级黄色毛片_在线观看播放_一级片精品_国产精成人品日日拍夜夜免费_草久在线视频

VIP標識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng)服務號
 

自主序列復制系統(tǒng)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-01
  自主序列復制系統(tǒng)(self-sustainedsequence replication,3SR),又稱依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)或再生長序列復制技術.1990年Guatelli等首先報道了這一技術.NASBA主要用于RNA的擴增、檢測及測序.該反應有賴于AMV逆轉(zhuǎn)錄酶,T7RNA多聚酶和核酸酶H(RNaseH)共同協(xié)作而完成.
  3SR反應體系中除含有上述三種酶外,還含有dNTP,NTP(核糖核苷),兩種特殊的引物和緩沖液.引物I3'末端與靶序列互補,5'端含T7RNA多聚酶的啟動子,這一引物是用于合成cDNA的.引物Ⅱ的堿基序列與cDNA的5'未端互補.
  在3SR反應時,首先引物Ⅰ與RNA模板復性(結(jié)合),AMV逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成cDNA,RNaseH水解cDNA上的RNA,形成一條單鏈的DNA;引物Ⅱ隨即與此cDNA的5'未端結(jié)合,逆轉(zhuǎn)錄酶在此DNA模板的指導下合成第二條DNA鏈.這樣形成的DNA雙鏈含有T7RNA多聚酶的啟動子.該酶即以此DNA為模板,轉(zhuǎn)錄出與樣品RNA序列相同的RNA鏈,而且每條DNA模板在該酶的作用下可合成約100個拷貝的RNA.每條新的RNA又可作為逆錄酶的模板合成cDNA.如此反復進行,將獲得更多的RNA和cDNA.
  其基本方法為:將引物,標本加入擴增反應液,65℃1min使RNA分子二級結(jié)構打開,降溫至37℃加入逆轉(zhuǎn)錄酶,T7RNA聚合酶和RNaseH,并在37℃反應1~1.5小時,其產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳,溴乙錠染色即可在紫外儀下看到條帶.NASBA的特點為操作簡便,不需特殊儀器,不需溫度循環(huán).整個反應過程由三種酶控制,循環(huán)次數(shù)少,忠實性高,其擴增效率高于PCR,特異性好.
 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.151 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 锵锵锵锵锵免费完整观看动漫最新章节 | 国内精品久久久久久久97牛牛 | 无码办公室丝袜OL中文字幕 | 四虎影视免费看 | 国产精品久久中文字幕 | 色噜噜亚洲男人的天堂 | 国产精品91av | 四虎永久在线精品免费观看 | 96精品在线观看 | 亚洲国产精品久 | 中文字幕久久熟女人妻av免费 | 内射欧美老妇WBB | 91av色 | 特级片免费看 | 国产午夜激无码Av片在线观看 | 亚洲精品午夜 | 成人自拍av | 日韩特黄一级片 | 色wwwwww| 91精品对白刺激国产在线 | 欧美三级欧美成人高清www | 欧美午夜在线精品品 | videos性欧美另类高清 | 色综合久久蜜芽国产精品 | 国产精品无码av网站 | 亚洲综合字幕 | 少妇无码一区二区二三区 | 亚洲欧美在线另类 | av成人永久免费看片本色 | 粗大猛烈进出呻吟声蜜臀视频 | 青草久久免费视频 | 黑人精品素人在线视频观看 | 亚洲欧美一区二区三区孕妇 | 久久午夜夜伦鲁鲁片无码免费 | 粉嫩91精品久久久久久久99蜜桃 | 最近更新中文字幕大全免费 | aaaa欧美 | 亚洲www| 日本男人日女人视频 | 在线免费国产精品 | 爆乳喷奶水无码正在播放 |