a国产亚洲欧美精品一区在线观看_看一级黄色毛片_在线观看播放_一级片精品_国产精成人品日日拍夜夜免费_草久在线视频

VIP標識 上網(wǎng)做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網(wǎng)服務號
 

質(zhì)粒DNA的大量制備

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-02
    (1)將2ml含相應抗生素的LB液體培養(yǎng)基加入到通氣良好的15ml的試管中,接入一單菌落,于37℃劇烈振蕩培養(yǎng)過夜。
  (2)將1ml含菌液倒入含相應抗生素的Lb 100ml中,37℃振蕩培養(yǎng)至A590=1.0(5~6h)。
  (3)加氯霉素(170μg/ml)擴增,37℃溫箱中培養(yǎng)過夜。
  (4)收集菌液于離心管中,冰浴10min。3000rpm,離心10min,去上清。
  (5)加溶液Ⅰ5ml懸浮菌體,將懸液倒入高速離心管中,搖勻,冰浴5min。
  (6)加溶液Ⅱ10ml輕輕混勻,室溫下5min。
  (7)加溶液Ⅲ7.5ml輕輕混勻,冰浴30min。15000rpm,4℃離心20min。
  (8)取上清液于高速離心管中,加2倍體積的無水乙醇,混勻,入-20℃3~5h。
  (9)15000rpm 4℃ 離心20min。
  (10)棄上清,將離心管倒放入真空泵中抽干(10~15min)。
  (11)用5ml1×TE溶解,加入RNase A 15~20μl,42℃水浴4h于過夜。
  (12)加入5ml飽和酚,混勻,4000~5000rpm離心5min,取上清液入5ml離心管內(nèi)。
  (13)分別加入2.5ml飽和酚,2.5ml氯仿,混勻后同樣離心收集上清。
  (14)加等體積氯仿/異戊醇(24:1)混勻,同樣離心收集上清。
  (15)加入1/10體積的3mol/l NaAc及2倍體積的無水乙醇于-20℃3~5h。
  (16)10000rpm 4℃離心20min。
  (17)棄上清,加入75%乙醇洗滌2次。
  (18)離心棄上清,真空抽干,加入適量1×TE溶解質(zhì)粒DNA。
 
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.845 second(s), 611 queries, Memory 2.29 M
主站蜘蛛池模板: 中国熟妇人妻videos | 高清一区二区三区四区 | 成人中文乱幕日产无线码 | 先锋av资源 | www.妞干网.com | 免费av黄色 | 国产欧美精品一区二区三区四区 | 91精品国产?合久久久欧美 | 丁香花在线影院观看在线播放 | 特黄特黄a级毛片免费专区 九色在线观看 | 国产精品高潮久久久久久 | 520av视频 | 日韩专区一区二区三区 | av中文字幕网免费观看 | 风间由美无打码在线观看 | 久久精品黄AA片一区二区三区 | 9热在线| 成人深夜福利视频 | 久久精品99国产精品酒店日本 | 91porny九色打屁股 | 国产高清无码日韩一区 | 丰满少妇一级片 | 成人无码精品免费视频在线 | 在线不卡日本V一区二区 | 欧美国产成人激情视频在线观看 | 好大好硬好深好爽想要AV | 让少妇爽到高潮视频 | 精品国产一区二区三区久久久久久 | 一个人看的日本hd免费 | 欧美日韩在线视频免费观看 | 欧美精品18VIDEOSEX性欧美 | 国产成人亚洲第一 | 午夜小视频在线 | 在线观看成人福利 | 四虎成人www成人影视网址 | 91精彩在线视频 | 性色av一二三天美传媒 | 亚洲第一页乱 | 亚洲网站免费观看 | 大黑香蕉在线视频国产 | 91亚洲专区 |