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基因槍法 particle bombardment

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-07-06

  該法又稱粒子轟擊(particle bombardment),高速粒子噴射技術(High-velocity particle microprojection)或基因槍轟擊技術(gene gun bombardment),是由美國Comel大學生物化學系John.C.Santord等于1983年研究成功。并在1987年,Vlein首先報道了應用此技術將TMV(煙草花葉病毒)RNA吸附到鎢粒表面,轟擊洋蔥表皮細胞,經檢測發現病毒RNA能進行復制,并以同樣技術將CAT(Chloraphericol acetyltransferase氯霉素乙酰轉移酶基因)基因導入洋蔥表皮細胞。現在,該技術已在煙草、水稻、小麥、黑麥草、甘蔗、棉花、大豆、菜豆、洋蔥、番木瓜、甜橙、葡萄等多種作物上成功。

  這一方法是依靠一種基因槍來幫助導入外源基因。基因槍根據動力系統可分為火藥引爆、高壓放電和壓縮氣體驅動三類。其基本原理是通過動力系統將帶有基因的金屬顆粒(金粒或鎢粒),將DNA吸附在表面,以一定的速度射進植物細胞,由于小顆粒穿透力強,故不需除去細胞壁和細胞膜而進入基因組,從而實現穩定轉化的目的。它具有應用面廣,方法簡單,轉化時間短,轉化頻率高,實驗費用低等優點。對于農桿菌不能感染的植物,采用該方法可打破載體法的局限。基因槍的轉化頻率與受體種類、微彈大小、轟擊壓力、制止盤與金顆粒的距離、受體預處理、受體轟擊后培養有直接關系。

 
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